国际商务标准
- 范围
本标准规定了虎杖提取物的技术要求、检验方法、检验规则和标签、包装、运输、贮存要求。
本标准适用于以虎杖根为原料经乙醇提取精制后，喷雾干燥而成的提取物。
- 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
《中华人民共和国药典》2010版一部附录Ⅸ G干燥失重测定法
《中华人民共和国药典》2010年版一部附录中Ⅸ J炽灼残渣检查法
《中华人民共和国药典》2010年版一部附录Ⅺ B（第二法）粒度测定法
《中华人民共和国药典》2010年版二部附录Ⅷ P（第一法）溶剂残留测定法
《中华人民共和国药典》2010年版一部中附录Ⅸ B（第一法）铅、镉、砷、汞、铜测定法
《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅩⅢ C微生物限度检查法
- 有效成分名称、结构式、分子式和相对分子质量
有效成分名称：白藜芦醇（Resveratrol）
分子式：C14H12O3
相对分子质量：、228.24、
结构式：
- 技术要求
- 工艺要求
- 植物原料
- 工艺要求
为蓼科植物虎杖 (Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.)的干燥根，春、秋二季采挖，除去须根，洗净，趁鲜切短段或厚片，晒干。
- 工艺过程
用乙醇提取或乙醇提取后经酶解，合并提取液，浓缩，精制，重结晶，干燥即得。
- 产品要求
4.2.1 感官要求：应符合表1的要求。
表1 感官规格与要求
| 项 目 | 要 求 | |
| 50%白藜芦醇 | 98%白藜芦醇 | |
| 色泽 | 黄棕色或棕褐色 | 白色或类白色 |
| 状态 | 粉末 | 粉末 |
4.2.2 理化要求:应符合表2规定。
表2 理化要求
| 项 目 | 规格与指标 | |||
| 50%白藜芦醇 | 98%白藜芦醇 | |||
| 鉴别 | 样品液相色谱图中应出现大黄素色谱峰，色谱特征应与标准品一致。 | — | ||
| 白藜芦醇含量，% | ≥50 | ≥98 | ||
| 大黄素，% | ≤2.0 | ≤0.1 | ||
| 干燥失重，% | ≤5.0 | ≤1.0 | ||
| 炽灼残渣，% | ≤5.0 | ≤0.5 | ||
| 粒度（80目筛通过率），% | ≥95 | — | ||
| 溶剂残留 | 甲醇，mg/kg | ≤100 | ||
| 乙醇，mg/kg | ≤500 | |||
| 铜（Cu），mg/kg | ≤20 | |||
| 铅（Pb）， mg/kg | ≤3.0 | |||
| 镉（Cd），mg/kg | ≤0.3 | |||
| 汞（Hg），mg/kg | ≤0.2 | |||
| 砷（As），mg/kg | ≤2.0 | |||
4.2.3 微生物要求:应符合表3规定。
表3 微生物要求
| 项 目 | 指 标 |
| 菌落总数，cfu/g | ≤1000 |
| 酵母菌及霉菌，cfu/g | ≤100 |
| 大肠埃希氏杆菌，cfu/g | 不得检出 |
| 沙门氏菌，cfu/25g | 不得检出 |
4.5 其他污染物：
其他污染物限量要求，对于出口产品，应符合出口目的国相关法规的规定；对于进口产品，依据不同用途，应符合我国相关法规的规定。
- 检验方法
- 感官检验
取试样适量置于白色瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽、外观，并检查有无异物。
- 理化检验
- 鉴别
按附录A.2中规定的方法进行鉴别，样品图谱中应出现大黄素色谱峰，色谱特征与标准对照品一致。
- 白藜芦醇含量
白藜芦醇的含量按附录A.3中规定的方法进行测定。
- 大黄素含量
大黄素含量按附录A.2中规定的方法进行测定。
- 干燥失重
按《中华人民共和国药典》2010版一部附录Ⅸ G规定的方法进行测定，称样量1.000g，干燥温度105℃。
- 炽灼残渣
按《中华人民共和国药典》2010年版一部附录中Ⅸ J规定的方法进行测定，称样量1.000g，灰化温度600℃。
- 粒度
按《中华人民共和国药典》2010年版一部附录Ⅺ B第二法进行测定。
- 溶剂残留
甲醇乙醇残留量按中国药典2010版二部附录Ⅷ P第一法进行检测
- 重金属（铜、铅、镉、汞、砷）
按《中华人民共和国药典》2010年版一部中附录Ⅸ B的第一法进行测定。
5.3 微生物检验
按《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅩⅢ C规定的方法进行测定。
6 包装、标签、运输、贮存
6.1 包装
包装材料应符合GB 9685 食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准的要求。
6.2 标签
6.2.1 包装标签上应标明：产品名称、批号、规格、净含量、执行标准、生产厂名、厂址、产地、生产日期、保质期、贮存条件。
6.2.2 外包装箱体上应标有：防潮、防晒、勿重压、朝上（朝下）等字样或标志。标签内容清晰可见，标签应粘贴牢固。
6.3 运输
运输时必须轻装轻卸，不得与有毒、有害、有异味、易污染物品混装载运，严防挤压、雨淋、暴晒。
6.4 贮存
产品应贮存于阴凉、清洁和干燥的仓库中。堆码距墙壁和地面20cm以上、并有垫隔物，堆放高度不得超过4桶。避免与有毒、有害、易腐、易污染等物品一起堆放。
6.5 保质期
在符合规定的贮运条件、包装完整、未经开启封口的情况下，保质期不超过24个月。
附录A
（规范性附录）
检验方法
A.1 一般规定
本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682规定的三级水。实验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。
A.2 大黄素的测定（鉴别）方法
A.2.1 方法提要
样品经超声溶解后，采用高效液相色谱法测定，以外标法定量。
A.2.2 试剂和材料
A.2.2.1 甲醇，色谱纯。
A.2.2.2 磷酸。
A.2.2.3 超纯水。
A.2.2.4 0.45 µm滤膜（有机相）。
A.2.3.5 大黄素标准品：CAS 518-82-1，纯度≥ 98%（HPLC）。
A.2.3 仪器
A.2.3.1 分析天平，感量0.01mg。
A.2.3.2 超声波清洗仪。
A.2.3.3 高效液相色谱仪（附紫外检测器）。
A.2.4 分析步骤
A.2.4.1 标准溶液的配制
称取8mg大黄素标准品（精确至0.01 mg)，置于100mL棕色量瓶中，加甲醇（A.2.2.1）超声溶解并稀释至刻度，经0.45 µm滤膜（有机相）过滤。现用现配。
A.2.4.2 供试品溶液的制备
称取100mg样品(精确至0.01 mg)，置于25mL棕色量瓶中，加入约15mL甲醇（A.2.2.1），超声溶解15min后取出，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀。用前过0.45µm微孔滤膜即可。
A.2.4.3 色谱条件及系统适用性
A.2.4.3.1 色谱柱：长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 µm，C18柱（岛津Wondasil C18或其他相当者）。
A.2.4.3.2 流动相：甲醇-0.1％磷酸溶液(85:15，V/V)，经0.45µm滤膜过滤、超声备用。
A.2.4.3.3 检测波长：254nm。
A.2.4.3.4 流速：1.0mL/min。
A.2.4.3.5 进样量：10µL。
A.2.4.3.6 柱温：室温。
A.2.4.4 测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µL注入液相色谱仪，按外标法测定含量，大黄素保留时间约5.8min。大黄素液相色谱图见附录B。
A.2.5 结果计算
大黄素含量以质量分数计，数值以％表示，按公式（A1）计算：
……………………………………（A1）
式中：
A ———供试品溶液中大黄素的峰面积；
AS ———对照品溶液中大黄素的峰面积；
C ———对照品溶液中大黄素的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；
V ———供试品溶液的体积，单位为毫升（mL）；
m ———试样的称样量，单位为毫克（mg）；
P ———大黄素标准品的纯度，以百分比（%）表示。
A.3 白藜芦醇的测定方法
A.3.1 方法提要
样品经超声溶解后，采用高效液相色谱法测定，用外标法定量。
A.3.2 试剂和材料
A.3.2.1 甲醇，色谱纯。
A.3.2.2 乙腈，色谱纯。
A.3.2.3 超纯水
A.3.2.4 0.45 µm滤膜（有机相）。
A.3.3.5 白藜芦醇标准品：CAS 501-36-0，纯度≥ 98%（HPLC）。
A.3.3 仪器
A.3.3.1 分析天平，感量为0.01mg。
A.3.2.2 超声波清洗仪。
A.3.2.3 高效液相色谱仪（附紫外检测器）。
A.3.4 分析步骤
A.3.4.1 标准溶液配制
称取10 mg白藜芦醇标准品(精确至0.01 mg),置于100mL棕色容量瓶中，用甲醇（A.3.2.1）超声溶解，并定容至刻度。经0.45 µm滤膜（有机相）过滤。现用现配。
A.3.4.2 样品溶液制备
称取规格98%样品10mg（规格50%样品称取20mg），精确至0.01mg，置于100mL棕色量瓶中，加入约80mL甲醇（A.3.2.1），超声提取15min后取出，放置至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀。用0.45 µm微孔滤膜（有机相）过滤，待测。
A.3.4.3 色谱条件及系统适用性
A.3.4.3.1 色谱柱：长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 µm，C18柱（岛津Wondasil C18或其他相当者）。
A.3.4.3.2 流动相：乙腈-纯水（27:73，V/V），经0.45 µm滤膜过滤、超声备用。
A.3.4.3.3 检测波长：303nm。
A.3.4.3.4 流速：1.2mL/min。
A.3.4.3.5 进样量：10µL。
A.3.4.3.6 柱温：室温。
A.3.4.4 测定
依次注射白藜芦醇标准试液和样品试液，在波长303nm处测定，外标法定量。白藜芦醇保留时间约7.4min。白藜芦醇液相色谱图见附录B。
A.3.5 结果计算
白藜芦醇含量以质量分数计，数值以％表示，按公式（A2）计算：
……………………………………（A2）
式中：
A ———供试品溶液中白藜芦醇的峰面积；
AS ———标准品溶液中白藜芦醇的峰面积；
C ———标准品溶液中白藜芦醇的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；
V ———供试品溶液的体积，单位为毫升（mL）；
m ———试样的称样量，单位为毫克（mg）；
P ———白藜芦醇标准品的纯度，以百分比（%）表示。
附录B
（资料性附录）
液相色谱图和参考保留时间
B.1 白藜芦醇液相色谱图和参考保留时间
B.1.1 白藜芦醇液相色谱图
白藜芦醇液相色谱图见图B.1、B.2、B.3。
图B.1 白藜芦醇标准品液相色谱图
图B.2 规格50%试样白藜芦醇液相色谱图
图B.3 规格98%试样白藜芦醇液相色谱图
B.1.2 白藜芦醇参考保留时间
表B.1 白藜芦醇参考保留时间
| 组分名称 | 保留时间（min） |
| 白藜芦醇标准品 | 7.45 |
| 规格50%试样白藜芦醇 | 7.46 |
| 规格98%试样白藜芦醇 | 7.46 |
B.2 大黄素液相色谱图和参考保留时间
B.2.1 大黄素液相色谱图
大黄素液相色谱图见图B.4、B.5。
图B.4 大黄素标准品液相色谱图
图B.5 规格50%试样大黄素液相色谱图
B.2.2 大黄素参考保留时间
表B.2 大黄素参考保留时间
| 组分名称 | 保留时间（min） |
| 大黄素标准品 | 5.77 |
| 规格50%试样大黄素 | 5.77 |
非商业性声明：上述所采用的设备、色谱柱、标准对照品等，涉及具体商业品牌、型号的，仅供参考，无商业目的，鼓励标准使用者尝试使用不同品牌、型号的设备、色谱柱及标准品。