苦瓜总皂甙UV检测方法
1.仪器与设备
1.1 754紫外-可见分光光度计
1.2 电子天平
1.3 层析柱
2.试剂与试液
2.1 甲醇
2.2 70%乙醇
2.3 中性氧化铝
2.4 Amberlite-XAD-2大孔树脂
2.5 高氯酸
2.6 冰乙酸
2.7 5%香草醛-冰乙酸试液：称取500mg香草醛，加冰乙酸溶解并定容至10mL,摇匀既得。
3.操作
3.1对照溶液配制
精确称取人参皂甙Re标准品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0mL，即每毫升含人参皂甙Re 2.0 mg。
3.2试样处理
称取试样适量（根据试样含皂甙含量定），置于50 ml容量瓶中，加少量水，超声30 min，再用水定容至50 ml，摇匀，放置，吸取上清液1.0 ml进行柱层析。
3.3柱层析：用10 ml注射器作层析管，内装3cm Amberlite-XAD-2大孔树脂，上加1 cm中性氧化铝。先用25 ml 70 %乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25 ml水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0 ml已处理好的试样溶液（见3.2），25 ml水洗柱，弃去洗脱液，用25 ml 70 %乙醇洗脱，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60℃水浴挥干。以此作显色用。
3.4显色：在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2 ml 5%香草醛-冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶解，再加0.8 ml高氯酸，混匀后移入5 ml带塞刻度试管中，60℃水浴上加热10 min，取出，冰浴冰却后，准确加入冰乙酸5.0ml，摇匀后，以1cm比色池于560 nm波长处与标准管一起进行比色测定。
3.5标准管：吸取人参皂甙Re标准溶液（2.0 mg/ ml）100 ul放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60℃），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2柱层析„”起，与试样相同。测定吸光度值。
4.计算：
式中：
ω——试样中总皂甙量，g /100 g；
A样——被测液的吸光度值；
A标——标准液的吸光度值；
C标——标准管人参皂甙Re的浓度，mg/ml；
V0——试样稀释体积，ml；
m0——试样质量，g 。
计算结果保留二位有效数字。
- 参考文献
《保健食品检验与评价技术规范》2003年版：二十三、保健食品中总皂甙的测定。