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人参提取物人参皂甙HPLC的检测方法

人参皂甙HPLC检测方法

1.标准品的制备:

分别精密称取人参皂甙Rg1、人参皂甙Re、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2和人参皂甙Rd适量至20ml容量瓶,用80%甲醇超声溶解后稀释到刻度。用0.45μm滤膜过滤后备用。

2.样品的制备:

精密称取供试品适量到50ml容量瓶,用80%甲醇超声溶解后稀释到刻度。用0.45μm滤膜过滤后备用。

3.检测步骤

按以下检测条件检测

仪器:Agilent 1100

色谱柱:Agilent HC-C18  4.6*250mm 5um

检测器:DAD

进样量:20ul

流速:1.0 ml/min

温度:35℃

检测波长:203nm

梯度洗脱程序:

T/min A(水) B(乙腈)
0 81 19
35 81 19
55 71 29
70 71 29
100 60 40
102 0 100
112 0 100
115 81 19

4.分析

分别取标准溶液和样品溶液注入液相色谱仪,以保留时间定性,以样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。

  1. 参考文献

参照《中国药典》2015年版一部

人参总皂甙UV检测方法

1.仪器与设备

1.1 754紫外-可见分光光度计

1.2 电子天平

 2.试剂与试液

2.1 甲醇

2.2 高氯酸

2.3 77%硫酸

2.4 1%香草醛-高氯酸试液:取香草醛100mg,加高氯酸溶解定容至10ml,摇匀既得。(现用现配)

3.操作

3.1对照溶液配制

精密称取人参皂甙Re对照品10.0mg,置10ml容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀既得对照品溶液。

3.2 标准曲线的制备

精密吸取对照品溶液 20ul、40ul、80ul、120ul、160ul、200ul,分别置于具塞试管中,低温挥去溶剂,加入1%香草醛-高氯酸试液0.5ml,置60℃恒温水浴上充分混匀后加热15分钟,立即用冰水冷却2分钟,加人77%硫酸溶液5ml,摇匀;以试剂作空白。消除气泡后照紫外-可见分光光度法,在540nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线。

3.3测定

取本品约50mg,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取50ul,照标准曲线的制备项下的方法,自"置于具塞试管中"起依法操作,测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Re的量,计算结果乘以0.84,即得。

本品按干燥品计,含人参总皂苷以人参皂苷Re计,应为65%〜85%。

4.计算:

式中:

ω——试样中总皂甙量(人参皂甙Re计),g /100 g;

m1——标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Re的量,mg;

m0——供试品称样量,mg;

V0——供试品稀释体积,ml;

V1——供试品吸样体积,ml。

计算结果保留二位有效数字。

  1. 参考文献

参照《中国药典》2015年版一部

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