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苦瓜提取物苦瓜甙保健品原料检测方法

苦瓜总皂甙UV检测方法

1.仪器与设备

1.1 754紫外-可见分光光度计

1.2 电子天平

1.3 层析柱

2.试剂与试液

2.1 甲醇

2.2 70%乙醇

2.3 中性氧化铝

2.4 Amberlite-XAD-2大孔树脂

2.5 高氯酸

2.6 冰乙酸

2.7  5%香草醛-冰乙酸试液:称取500mg香草醛,加冰乙酸溶解并定容至10mL,摇匀既得。

3.操作

3.1对照溶液配制

精确称取人参皂甙Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10.0mL,即每毫升含人参皂甙Re 2.0 mg。

3.2试样处理 

称取试样适量(根据试样含皂甙含量定),置于50 ml容量瓶中,加少量水,超声30 min,再用水定容至50 ml,摇匀,放置,吸取上清液1.0 ml进行柱层析。

3.3柱层析:用10 ml注射器作层析管,内装3cm Amberlite-XAD-2大孔树脂,上加1 cm中性氧化铝。先用25 ml 70 %乙醇洗柱,弃去洗脱液,再用25 ml水洗柱,弃去洗脱液,精确加入1.0 ml已处理好的试样溶液(见3.2),25 ml水洗柱,弃去洗脱液,用25 ml 70 %乙醇洗脱,收集洗脱液于蒸发皿中,置于60℃水浴挥干。以此作显色用。

3.4显色:在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2 ml 5%香草醛-冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣都溶解,再加0.8 ml高氯酸,混匀后移入5 ml带塞刻度试管中,60℃水浴上加热10 min,取出,冰浴冰却后,准确加入冰乙酸5.0ml,摇匀后,以1cm比色池于560 nm波长处与标准管一起进行比色测定。

3.5标准管:吸取人参皂甙Re标准溶液(2.0 mg/ ml)100 ul放蒸发皿中,放在水浴挥干(低于60℃),或热风吹干(勿使过热),以下操作从“3.2柱层析„”起,与试样相同。测定吸光度值。

4.计算: 

式中:

ω——试样中总皂甙量,g /100 g;

A——被测液的吸光度值;

A——标准液的吸光度值;

C——标准管人参皂甙Re的浓度,mg/ml;

V0——试样稀释体积,ml;

m0——试样质量,g 。

计算结果保留二位有效数字。

  • 参考文献

    《保健食品检验与评价技术规范》2003年版:二十三、保健食品中总皂甙的测定。

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